电针改善老龄大鼠术后认知功能障碍的海马应激免疫调控机制

【摘要】目的探讨老龄大鼠术后认知功能障碍(postoperationcognitivedysfunction,POCD)与应激反应的关系以及电针治疗术后认知功能障碍的应激免疫调节机制及其效果。方法清洁级雌性SD大鼠100只(12月龄),随机分为空白组(C组,10只)模型组(30只)、电针组(30只)、药物组(30只)。按照造模后处死的时间模型组又分为模型1天组(Mld组,10只)、模型3天组(M3d组,10只)、模型7天组(M7d组,10只)三个亚组,电针组又分为电针1天组(Eld组,10只)、电针3天组(E3d组,10只)、电针7天组(E7d组,10只)三个亚组,药物组又分为药物1天组(Dld组,10只)、药物3天组(D3d组,10只)、药物7天组(D7d组,10只)三个亚组。对大鼠行morris水迷宫训练连续五天,每日一次,空白组训练完成后4天处死,训练完成后对除空白组外的大鼠行肝叶切除术手术,电针组术后2小时行电针干预治疗,每日一次,药物组于术后2小时注射美满霉素,每日一次,空白组、3天组、7天组处死前行morris水迷宫测试。观察指标：(1)采用morris水迷宫检测大鼠学习和记忆功能(逃避潜伏期和目标象限停留时间)；(2)采用酶联免疫吸附法测定大鼠血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)和肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量；(3)免疫组织化学法检测海马中GR、MHCⅡ、CD200、CD200R的含量；(4)荧光定量PCR检测GR、TLR2、TLR4、MHCⅡ的mRNA表达情况。结果(1)morris水迷宫测试大鼠学习和记忆功能造模前行水迷宫训练10组大鼠学习能力及空间探索能力均相差不大,任意两组间找到平台的时间无明显差别(P>0.05),处死前检测M3d组、M7d组在目标象限停留时间较C组明显下降(P<0.01),E3d组、D3d组在目标象限停留时间较M3d组长,差异有统计学意义,E7d组、D7d组在目标象限停留时间较M7d组长,差异有统计学意义。(2)ELISA检测大鼠血清中HPA轴激素水平M1d组、M3d组、M7d组ACTH、CORT、CRH水平较C组显著升高(P<0.01);Dld组ACTH水平均较M1d组水平下降,差异有统计学意义；Eld、D1d组CORT水平均较Mld组水平下降,差异有统计学意义。E3d组、D3d组ACTH、CORT、CRH水平均较M3d组水平下降,差异有统计学意义。E7d组、D7d组ACTH、CORT、CRH水平均较M7d组水平下降,差异有统计学意义。(3)荧光定量PCR检测GR、TLR2、TLR4、MHCⅡ的mRNA表达情况。Mld组、M3d组、M7d组GRmRNA表达均较C组显著下降(P<0.01),E1d组、Dld组GRmRNA表达均较Mld组显著上升,差异有统计学意义,E3d组、D3d组GRmRNA表达均较M3d组显著上升,差异有统计学意义,E7d组、D7d组GRmRNA表达均较M7d组显著上升,差异有统计学意义；M1d组、M3d组、M7d组TLR2/4mRNA表达均较C组显著上升(P<0.01),E3d组、D3d组TLR2/4mRNA表达均较M3d组显著下降,差异有统计学意义,E7d组、D7d组TLR2/4RNA表达均较M7d组显著上升,差异有统计学意义；Mld组、M3d组、M7d组MHCⅡmRNA表达均较C组显著上升(P<0.01),E3d组、D3d组MHCⅡmRNA表达均较M3d组显著下降,差异有统计学意义,E7d组、D7d组MHCⅡRNA表达均较M7d组显著上升,差异有统计学意义。(4)Mld组、M3d组、M7d组GR阳性细胞数低于C组(P<0.01)。Eld组和Dld组、E3d组和D3d组、E7d组和D7d组GR阳性细胞数较模型组升高,差异有统计学意义。M1d组、M3d组、M7d组MHCⅡ阳性细胞数高于C组(P<0.01)。E1d组和Dld组MHCⅡ阳性细胞数与Mld组比较略低,但差异无统计学意义(P>0.05),E3d组、D3d组MHCⅡ阳性细胞数较M3d组降低,差异有统计学意义。E7d组和D7d组MHCⅡ阳性细胞数较M7d组降低,差异有统计学意义。Mld组、M3d组、M7d组CD200阳性细胞数低于C组(P<0.01)。Eld组和Dld组、E3d组和D3d组、E7d组和D7d组CD200阳性细胞数较模型组升高,差异有统计学意义。M1d组、M7d组CD200R阳性细胞数高于C组,但差异无统计学意义(P>0.05),M3d组CD200阳性细胞数高于C组,差异有统计学意义,D3d、D7d组CD200R阳性细胞数低于模型组,且差异有统计学意义,Eld组、E3d组、E7d组、Dld组CD200R阳性细胞数略低于模型组,差异无统计学意义(P>0.05)。结论电针能调整POCD模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(Hypothalamic-pituitary-adrenocorticalAxis,HPA轴),改善应激激素水平升高对海马造成的持续损害,降低小胶质细胞的活化程度,抑制海马炎症的发生,从而改善术后认知功能障碍。
【作者】叶雷；
【导师】刘喆；
【作者基本信息】浙江中医药大学，针灸推拿学，2014，硕士
【关键词】术后认知功能障碍；海马；应激；电针；

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